25号公路是连接华蓝市与正辉研究所的重要通道，需要玩家掌握居合斩（HM01）技能才能完全通行。该路段分布着5名连续对战训练师，包括使用飞行系和一般系宝可梦的对手，建议队伍中至少配备电系或岩石系宝可梦应对。公路尽头的小屋内可获得重要道具船票，这是触发圣安奴号剧情的关键物品。
通过25号公路前需确保队伍中有已学会居合斩的宝可梦，该技能可通过完成正辉支线任务获得。具体流程为：在华蓝市北面出口使用冲浪术渡过水域，击败沿途训练师后进入海岸边的独立小屋。与屋内的皮皮对话后操作电脑，帮助正辉恢复人形，即可获得圣安奴号船票作为奖励。该道具将解锁枯叶市的航海剧情线。
25号公路的训练师阵容包括LV18比比鸟、LV16波波和LV15小拉达等，其招式组合以啄攻击和电光一闪为主。建议携带至少LV20以上的主力宝可梦，并准备3-5个伤药备用。公路中段设有隐藏道具金珠，位于右侧第三棵可砍伐树木后的草丛中，使用道具探测器可精确定位。该道具出售给商店可获得5000金币。
通过25号公路后，玩家将正式开启关都地区的航海剧情。圣安奴号船票需在枯叶市码头使用，登船后将遭遇包括劲敌小茂在内的多位训练师挑战。25号公路在完成航海剧情后仍可重复挑战训练师获取经验值，但船票获取任务仅能完成一次。建议在首次通过时保存游戏进度以防意外中断。
25号公路的地形设计包含多重障碍物，需按特定顺序使用居合斩清除路障。正确的通行路径为：入口处砍伐第一棵树→击败前两名训练师→清除右侧两棵并列树木→获取金珠→继续向北前进。若中途宝可梦体力不足，可返回华蓝市宝可梦中心恢复，该路段未设置野生宝可梦遭遇区域。
最终到达正辉研究所时，建议队伍中保留空位以便接收赠送的宝可梦。完成25号公路全部探索后，玩家将解锁关都地区中部与东部的连接通道，为后续挑战枯叶道馆奠定基础。该路段所有训练师均可通过战斗探测器重复对战，是中期练级的重要地点之一。
